Rivera P1, Díaz LA1, Arnold J1, Idalsoaga F1, Ayares G1, Villalon A1, Allende F2, Solari S2, Hernández A1, Solís N1, Cabrera D1, Barrera F1, Arrese M1, Arab JP1.1Departamento de Gastroenterología, Escuela de Medicina, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile. 2Departamento de Laboratorios Clínicos, Escuela de Medicina, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile.
Introducción: La hepatitis asociada a alcohol (HA) se asocia con alta morbimortalidad y con limitadas opciones terapéuticas. Entre los mecanismos de daño, se encuentra la liberación de vesículas extracelulares (EVs) desde hepatocitos dañados, las que pueden estar implicadas en la progresión de la HA, mediando la respuesta inflamatoria y profibrótica en el hígado. Objetivos: Evaluar efecto de tratamiento de medio condicionado con vesículas extracelulares sobre inflamación y fibrosis en un modelo in vitro hepático. Materiales y Métodos: Se aislaron EVs de pacientes con HA mediante ultracentrifugación y fueron cuantificadas por Nanoparticle tracking analysis (NTA). Se realizó cuantificación de proteínas mediante método BCA y Western Blot para confirmar exosomas. Células de la Línea celular Huh-7 fueron cultivadas y tratadas con medio DMEM condicionado con un pool de EVs-HA por 24 horas y luego se realizó extracción de RNA para evaluar la expresión génica de moléculas inflamatorias y fibrosis, por qRT-PCR (figura 1). Resultados: La concentración promedio de vesículas extracelulares en pacientes HA encontrada fue de 1.292 E11 ± 6,4 E10 partículas/mL. Se observó mayor expresión génica de IL-6, (3,3 veces de cambio, p = 0,474), Colla (3,17 veces de cambio, p = 0,483), TGF-0 (1,8 veces de cambio, p = 0,445), Ppar-Y (1,3 veces de cambio, p = 0,166). Conclusión: Las EVs podrían modular la fisiopatogénesis de la HA convirtiéndose en un potencial blanco terapéutico. Financiado FONDECYT #1191145 a M.A., #1191183 a F.B., #1211879 a DC y #1200227 a JPA.
PDF | DOI: 10.46613/congastro2022-25
XLIX Congreso Chileno de Gastroenterología – 2022